Menu
Categorieën
 
lupus antistollings middelen testen

Lupus Antistollingsmiddel Testen

Prestaties en praktijken door Noord-Amerikaanse klinische laboratoria

  1. Ellinor IB Peerschke , PhD 1

+Auteur Affiliations


  1. 1 Vanuit de afdeling Pathologie, Mount Sinai School of Medicine, New York, NY;

  2. 2 ECAT Liaison naar NASCOLA, Islamorada, FL; en

  3. 3 ECAT Foundation, Leiden, Nederland
  1. Adres herdruk aanvragen tot Dr Peerschke: Centrum voor Klinische Laboratoria, 1425 Madison Ave, kamer 8-02 A, New York, NY 10029.

Abstract

Lupus anticoagulans (LAC) testen is belangrijk voor het evalueren van patiënten met antifosfolipide syndromen en hypercoaguleerbare staten. We beoordeeld resultaten van ringonderzoeken uitdagingen (n = 5) verspreid door de Noord-Amerikaanse Specialized Stolling Laboratory Association om LAC testen uitgevoerd door de deelnemende laboratoria onderzocht. De geactiveerde partiële tromboplastine tijd (APTT) en verdun Russell viper gif tijd (dRVVT) vormden belangrijke testmethoden. In screening studies, LAC-gevoelige APTT methoden waren gevoeliger voor zwakke LAC dan dRVVT-gebaseerde methoden, maar minder specifiek. In bevestigend onderzoek, dRVVT methoden presteerden beter, maar de prestaties was LAC-afhankelijk. De hoogste vals-negatieve bevestigende test resultaten werden verkregen voor de bloedplaatjes neutralisatie procedure.Het niet naleven van aanbevelingen voor LAC testen door de International Society op trombose en hemostase was hoog (8% -38%), met de meerderheid van noncompliant laboratoria niet in slagen om de resultaten van het mengen van studies rapporteren. Deze gegevens geven nieuwe inzichten in LAC testen in Noord-Amerika en het identificeren van mogelijkheden voor standaardisatie.

Trefwoorden:

Laboratoriumonderzoek naar de aanwezigheid van een lupus anticoagulans (LAC) is een integraal onderdeel van de diagnose van patiënten met antifosfolipide syndromen en hypercoaguleerbare staten. 1 – 6 LAC’s zijn heterogeen circulerende autoantilichamen, voornamelijk van IgG en IgM isotypen, gericht tegen epitopen vinden op negatief geladen fosfolipide -bindende eiwitten, die fosfolipide-afhankelijke coagulatie reacties remt in vitro. 4 – 7 Paradoxaal behalve in zeldzame gevallen LAC’s zijn geassocieerd met verhoogde arteriële en veneuze trombose, niet met bloeden. 2 Klinisch complicaties van LAC’s zijn betrokken bij beroerte, voorbijgaande ischemische aanvallen, herhaalde spontane abortus, en verworven trombofilie. 2 , 3 , 8 Sinds de trombotische potentieel is groot bij patiënten met LAC, nauwkeurige diagnose is essentieel voor de risicobeoordeling en de langdurige behandeling van de patiënt met antistollingsbehandeling. 2 , 9

Significante verschillen bestaan ​​tussen gespecialiseerde coagulatie laboratoria bij LAC testen testen, methoden, praktijken en resultaten. 2 , 3 , 6 , 10 Eerdere studies voornamelijk uitgevoerd in het Verenigd Koninkrijk en Italië toonden een hoge vals-negatieve en vals-positieven (~ 20%) voor LAC detectie. 1 , 2 De variabiliteit in de testresultaten was toe te schrijven niet alleen om analytische factoren, maar ook om preanalytic en postanalytic overwegingen. 6 , 11 Tot op heden is geen enkele test heeft aangetoond dat het 100% gevoeligheid voor LAC. 2 Bovendien er erkend variabiliteit in de gevoeligheid van de meest gebruikte testen, werkwijzen en reagentia verschillende LAC preparaten. 1 , 12 Om het probleem verergeren, tests en reagentia variabel gevoelig voor storingen zoals heparine en specifieke factor deficiënties en inhibitoren, waardoor vals-positieve LAC testresultaten.Vals-negatieve resultaten zijn gerapporteerd als plasma is niet voldoende bloedplaatjes arm en verdunningshyponatriëmie effecten van het mengen van studies variabel invloed detectie van een zwakke LAC. 10

Om LAC testen te verbeteren, de International Society of trombose en hemostase (ISTH) gepubliceerd testen richtlijnen in 1995, 13 die in 2009 werden herzien. 14Aanbevelingen zijn onder meer het volgende: (1) ten minste 2 screening tests die verlenging van een aan te tonen fosfolipide- afhankelijke stollingstijd met verschillende keuringsprincipes, (2) een meng onderzoek om de aanwezigheid van een remmer bevestigen en een factor deficiëntie sluiten, en (3) een bevestigende test die fosfolipide-afhankelijke remmende activiteit wordt getoond. De richtlijnen stellen ook voor het uitsluiten van andere coagulopathieën. Ondanks de bestaande aanbevelingen, 13 blijft er een gebrek aan uniformiteit tussen laboratoria op de plaatselijke testprotocollen en procedures en interpretatie leiden.

De huidige studie werd ontworpen om LAC testen en praktijken te evalueren door Noord-Amerikaanse klinische laboratoria, met behulp van de resultaten van 4 opeenvolgende bekwaamheidstesten uitdagingen verspreid in 2008 en 1 bekwaamheidstesten uitdaging in 2009. Voor zover ons bekend, is dit het eerste onderzoek specifiek gericht op de klinische laboratoria in de Verenigde Staten en Canada. De resultaten leveren belangrijke inzichten in LAC testen en het identificeren van mogelijkheden voor verdere inspanningen op standaardisatie.

Materialen en methoden

De Noord-Amerikaanse Specialized Stolling Laboratory Association (NASCOLA) is een non-profit organisatie die bekwaamheidstesten modules verdeelt aan Noord-Amerikaanse klinische laboratoria uitvoeren van diagnostische testen voor bloeden en prothrombotic aandoeningen. De organisatie creëert een forum voor de kritische evaluatie van de procedures coagulatie testen en gebruiken om te helpen bij het ontwikkelen van richtlijnen voor het juiste gebruik, de prestaties, en de interpretatie van de bloedstolling tests en resultaten.

Het huidige onderzoek richt zich op LAC testen praktijken en prestaties door het analyseren van de resultaten van 4 opeenvolgende bekwaamheidstesten enquêtes verspreid in 2008 en 1 in 2009. Het aantal deelnemende laboratoria varieerde per enquête, met 46-53 laboratoria overleggen van de resultaten.

Monsters bestond uit gevriesdroogde plasma verkregen van de ECAT (Europese gecoördineerde actie op Thrombophilia) Foundation (Leiden, Nederland). Geen klinische informatie is verstrekt. Proficiency test sample kenmerken waren als volgt: Monster 2008-1 was een commerciële pool (lot nr. 2V72A00, Technoclone, Wenen, Oostenrijk) van hoge titer LAC-positieve plasma monsters. Monster 2008-2 was plasma verkregen van een enkele vrouwelijke donor met een medium-titer LAC maar geen geschiedenis van trombose. Monster 2008-3 vertegenwoordigde een commerciële plasma pool (lot nr. 2U81A00, Technoclone) met een lage titer LAC, bereid uit een pool van lupus-positieve plasma monsters.Steekproef 2008-4 bestond uit een enkele donor plasma monster met medium-titer LAC verkregen van een vrouwelijke patiënt zonder gerapporteerde geschiedenis van trombotische gebeurtenissen. Deze plasmamonster werd verdund met normale gepoolde plasma in een verhouding van 04:01. Tenslotte monster 2009-2 vertegenwoordigde een normaal plasma pool die geen LAC.

Deelnemende laboratoria gevraagd om elke ringonderzoeken steekproef op basis van hun lokale LAC testprotocol analyseren. Elk laboratorium gerapporteerde resultaten voor screening, mengen, en bevestigende tests en omvatte een algemene beoordeling van de aanwezigheid of afwezigheid van LAC. Resultaten voor test en werkwijze combinaties gerapporteerd door 3 of meer deelnemers werden opgenomen in de analyse. Resultaten onwaarschijnlijk assay en werkwijze combinaties, bijvoorbeeld kaolien recalcificatietijd uitgevoerd met een geactiveerde partiële tromboplastinetijd (APTT) reagens dat ellaginezuur, die postanalytic fouten werden uitgesloten. Alleen resultaten gerapporteerd door de deelnemers als stollingstijd in seconden werden geëvalueerd. Geïsoleerde laboratoria uitsluitend gemeld stollingstijd verhoudingen ten opzichte van de referentie plasma voor screening, mengen, en bevestigend onderzoek.

Het gemiddelde en de standaarddeviatie (SD) werden berekend voor numerieke gegevens. Screening testresultaten werden vergeleken met resultaten van lokale referentie plasmamonsters verkregen met een ongepaarde Student t- test. Een pwaarde van 0,05 of minder werd beschouwd als statistisch significant. Voor het doel van deze studie werden de resultaten van het mengen van studies vergeleken door het berekenen van de index van circulerende anticoagulans (ICA), ook bekend als de Rosner Index, 15 op basis van gegevens die door de deelnemers.Aangezien info betreffende laboratorium cutoffs werd een ICA groter dan 15 wijst op een LAC beschouwd, zoals oorspronkelijk door Rosner et al. voorgesteld. 15bevestigingstest resultaten werden geëvalueerd volgens deelnemer interpretatie: positief, negatief of positief grens LAC. Algehele uitvoering van de assay werd geëvalueerd door vals-positieve en fout-negatieve uitslagen.

Tot slot, de naleving van de LAC-testrichtlijnen 13 , 14 werd beoordeeld op basis van resultaat rapportage patronen. De gegevens die inzicht geven in het aantal en type van screening tests uitgevoerd en de naleving van het mengen en bevestigende studie aanbevelingen. Bovendien is de impact van de naleving van de LAC testen richtlijnen voor algehele nauwkeurigheid van eindresultaat interpretaties werd onderzocht.

Resultaten

Resultaten van 248 LAC testdeelvensters geëvalueerd. Deze werden door 46-53 laboratoria ingediend voor 5 bekwaamheidstesten uitdagingen. Monsters met sterke (2008-1) en zwakke (2008-2, 2008-3 en 2008-4) LAC en een normale plasma monster (2009-2) werden geanalyseerd. LAC test werd uitgevoerd met verschillende test en werkwijze combinaties. De meest gebruikte combinaties zijn vermeld in tabel 1 vertegenwoordigen en geautomatiseerde methoden. Door het grote aantal typen en methoden assay ten opzichte van het aantal rapportage laboratoria, geen verdere sub-analyse van door instrumenten niet voldoende onderscheidend vermogen.

Bekende screening testresultaten voor uitdagingen vaardigheid beschouwd in deze studie zijn samengevat in Tabel 2 . Resultaten werden vergeleken door analyse en werkwijze combinaties.

Deelnemende NASCOLA laboratoria uitgevoerd overwegend APTT-en / of verdunde Russell viper gif tijd (dRVVT)-gebaseerde screening tests in alle 5 bekwaamheidstesten enquêtes. Hoewel de gemiddelde stollingstijden gevarieerd, werden screening testresultaten relatief strak verdeeld rond het gemiddelde voor elke test-methode combinatie. Zoals verwacht, werd de grootste screeningstest verlenging, die voor het monster 2008-1, waarbij de sterke LAC bevatte.Omgekeerd werd het minst verlenging waargenomen voor sample 2009-2, normaal plasma. Grotere variabiliteit werd opgemerkt in het vermogen van verschillende test en methode combinaties om tussen-en lage-titer LAC identificeren in monsters 2008-2, 2008-3 en 2008-4. Hoewel gemiddelde stollingstijd gerapporteerd voor monsters met LAC waren significant verhoogd ( p<0,05), de mate van screening verlenging gevarieerd door assay-werkwijze combinatie.

Tabel 1

Assay en Methode Combinaties

Tabel 2

Samenvatting van Screening Test Resultaten *

Een vergelijking van de screeningstest prestaties voor LAC detectie wordt weergegeven in tabel 3 . Hoewel de meeste assay methode en combinaties waargenomen verschillen in LAC titer in de 5 bekwaamheidstesten uitdagingen, de gegevens suggereren dat APTT-gebaseerde screeningtests bijzonder LAC-gevoelige APTT werkwijzen, waren gevoeliger voor tussen-en lage-titer LAC dan dRVVT-gebaseerde methoden. Echter, de vals-positieve percentage was iets hoger. Inderdaad, alle vals-positieve resultaten werden waargenomen met LAC-gevoelige reagentia. Deze resultaten zijn echter, moeten voorzichtig worden geïnterpreteerd, omdat de totale aantallen zijn laag, met 1 of 2 vals-negatieve of vals-positieve resultaten per categorie.

Resultaten van vermenging studies zijn samengevat in Tabel 4 . Om de gevoeligheid van verschillende assay en wijze combinaties vergelijken LAC berekenden we de ICA 15 voor alle resultaten die werden vergezeld van de stollingstijd van normaal plasma getest monster op dezelfde wijze. ICA waarde hoger dan 15 suggereerde de aanwezigheid van een LAC beschouwd. 15aanzienlijke variabiliteit in ICA scores zal duidelijk verschillende assay werkwijze en combinaties, in het bijzonder voor monsters met zwakkere LAC. Gebaseerd op zelf-gerapporteerde interpretaties van het mengen van studies, alle deelnemers gewezen op de aanwezigheid van LAC in steekproef 2008-1. Wanneer de berekende ICA werd toegepast, een algemene vals-negatieve van 3,4% waargenomen. Alle fout-negatieve uitslagen voor deze bekwaamheidstesten monster opgetreden met 1 LAC-gevoelige reagens (methode 21; Tabel 4 ).Detectie van zwakke LAC in monsters 2008-2, 2008-3 en 2008-4 gevarieerd voor een APPT-en dRVVT-gebaseerde methoden met behulp van zelf-gerapporteerde of berekend (ICA) interpretaties. Alle resultaten voor monster 2009-2 waren consistent met de afwezigheid van LAC.

Tabel 3

Prestaties van Major LAC screeningstesten *

Tabel 4

Samenvatting van het mengen studieresultaten *

De vergelijking van het mengen-studie sensitiviteit voor LAC detectie wordt samengevat in Tabel 5 . Hoewel variabiliteit prestatie werd waargenomen over methoden wanneer de ICA werd gebruikt voor het mengen-studie interpretatie APTT-gebaseerde vermenging studies bleken gevoeliger voor zwakke LAC te zijn dan dRVVT-gebaseerde vermenging studies. Echter, de prestaties waren vergelijkbaar wanneer een lokale interpretaties werden gebruikt voor het mengen methode vergelijkingen.

Resultaten van bevestigend onderzoek zijn samengevat in Tabel 6 . Testen werd uitgevoerd met behulp van een verscheidenheid aan commerciële en zelfgemaakte reagentia en werkwijzen. Resultaten voor deze assays en methoden met meer dan 3 gegevens inzendingen worden getoond en vertegenwoordigen geautomatiseerd testen exclusief. De geïntegreerde analyse, methode 58 (Stago / Roche, Staclot LA, Asnières, Frankrijk), was de meest gebruikte bevestigende test, met 18 tot 23 laboratoria rapporteren van resultaten. Alle laboratoria met behulp van deze methode correct geïdentificeerd de sterke lupus anticoagulans in steekproef 2008-1 en meestal geïdentificeerd zwak LAC in steekproef 2008-3, maar niet in monsters 2008-2 en 2008-4. Het is interessant dat 4 laboratoria gebruik van deze methode onjuist geïdentificeerd een borderline LAC in steekproef 2009-2, de normale plasma monster. dRVVT bevestigend onderzoek ook uniform gewezen op de sterke LAC in steekproef 2008-1, en ​​laboratoria voornamelijk gemeld borderline en negatieve resultaten voor monsters 2008-2, 2008-3 en 2008-4.Alleen 1 vals-positieve (borderline LAC) werd gemeld voor het monster 2009-2.Testen op basis van de bloedplaatjes neutralisatie procedure (PNP) identificeerde de sterke LAC in steekproef 2009-1 maar toonde algemeen hoger vals-negatieve uitslagen voor het opsporen van zwakke LAC vergeleken met geïntegreerde APTT of dRVVT methoden. Bovendien werd 1 borderline positief LAC resultaat gerapporteerd voor de normale monster met behulp van een PNP-gebaseerde methode. Een vergelijking van bevestigende assay prestaties verschaft in Tabel 7 .

Tabel 5

Vergelijking van het mengen Studies voor LAC Detection *

Tabel 6

Samenvatting van de bevestigende test resultaten *

NASCOLA / ECAT bekwaamheidstesten uitdagingen voor LAC vereisen ook laboratoria om een algemene beoordeling / uiteindelijke diagnose van de aanwezigheid of afwezigheid van LAC op basis van alle uitgevoerde tests maken.Vijf interpretatieve keuzes worden aangeboden: duidelijk positief, positief, waarschijnlijk positief, borderline, en negatief. Voor het doel van deze studie, werden de rapporten van duidelijk positief, positief, en waarschijnlijk positief gegroepeerd als positief. Een overzicht van de uiteindelijke interpretatie wordt getoond in Tabel 8 . Zoals verwacht, interpretaties weerspiegelt de sterkte van deze LAC in de individuele bekwaamheidstesten monsters. Alle laboratoria die de sterke LAC in steekproef 2008-1, maar identificatie van zwakkere lupus anticoagulantia in monsters 2008-2, 2008-3 en 2008-4 was meer variabel.Overall, vals-negatieve uitslagen voor monsters 2008-1, 2008-2, 2008-3 en 2008-4 waren 0%, 28%, 25% en 24%, respectievelijk. Borderline resultaten indicatief voor LAC beschouwd in deze monsters.

Om het aantal valse meldingen van LAC detectie door NASCOLA laboratoria te evalueren, werd een normale steekproef verspreid voor het testen. Hoewel er geen positieve resultaten werden gemeld door de grote test-methode combinaties voor dit normaal plasma monster (2009-2), de totale vals-positieve tarief voor deze oefening was ongeveer 11% als borderline resultaten werden opgenomen als bewijs van LAC. Het is interessant dat het grootste aantal vals-positieve resultaten (borderline) werd gemeld door de deelnemers met behulp van geïntegreerde APTT methode 58. De laagste foutpositieven opgetreden met dRVVT-gebaseerde methoden.

Tabel 7

Prestaties van bevestigende Testen voor LAC Identificatie *

Tabel 8

Samenvatting van Final LAC Testing Interpretatie en Laboratory Practices

Daarnaast werden gevallen van verkeerde interpretatie van het laboratorium testresultaten bekend om monsters die zwak LAC (2008-2, 2008-3 en 2008-4).Een minderheid van de laboratoria (1-2 in elke bekwaamheidstesten uitdaging) gemeld finale interpretaties die in strijd waren met bevestigende testresultaten: bijvoorbeeld, werd een positieve uiteindelijke interpretatie gemeld met negatieve bevestigende testresultaten en vice versa. Die op de aanwezigheid van zwakke LAC in monsters 2008-3 en 2008-4, 3 en 2 laboratoria, respectievelijk geïnterpreteerd zowel positief als negatief bevestigende testresultaten als borderline in de uiteindelijke diagnose.

Een totaal van 25 laboratoria onjuist heeft beoordeeld op de aanwezigheid of afwezigheid van LAC in bekwaamheidstesten daagt 2008-2, 2008-3, 2008-4 en 2009-2. Geen van deze laboratoria gerapporteerde fout-negatieve uitslagen voor monster 2008-1 bevat de sterke LAC. Dertien laboratoria gerapporteerd 1 LAC onjuiste diagnose. Vijf deelnemende laboratoria gerapporteerd fout-negatieve uitslagen in 3 opeenvolgende testen voor monsters die zwak LAC’s. Zeven laboratoria gemeld vals-negatieve resultaten over 2 opeenvolgende testen. De 5 deelnemers die false-positive/borderline resultaten voor monster 2009-2 gemeld correct geïdentificeerd LAC in alle 2008 uitdagingen. Het is interessant dat er geen verschil werd opgemerkt in de mate van het testen, dat wil zeggen, het aantal tests uitgevoerd door laboratoria rapporteren juiste en onjuiste LAC identificaties ( Tabel 8 ). De totale vermindering van de tests voor monster 2009-2 weerspiegelt een afname mengen studies van dit monster met overweldigend normale screening testresultaten.

Naleving ISTH richtlijnen voor de evaluatie van LAC varieerde tussen de laboratoria en voor de 5 periodes bekwaamheidstesten ( Tabel 8 ). Niet-naleving het laagst (8%) voor bekwaamheidstesten uitdaging 2008-1 en hoogste (38%) voor het testen van taalvaardigheid uitdaging 2008-3. In de meeste gevallen laboratoria die niet voldoen werden geen studies uitgevoerd mengen. Een totaal van 27 afzonderlijke laboratoria niet aan het testen richtlijnen in ten minste 1 testperiode. Vijftien laboratoria niet aan het testen richtlijnen meer dan eens, met 1 laboratorium wordt consequent noncompliant in alle 5 testen uitdagingen. Op basis van de gerapporteerde resultaten, werden 3 laboratoria als niet-conforme in 4 testen periodes en 5 laboratoria in 2 en 3 testperiode elk. Paradoxaal genoeg, een analyse van het testen resultaten / prestaties van de naleving aangegeven dat de totale, compliant laboratoria aanzienlijke vals-negatieve uitslagen (had Tabel 8).

Discussie

De laboratoriumdiagnose van LAC uitdagend. 16 , 17 Dit komt grotendeels de heterogeniteit van LAC reageren met weinig gekarakteriseerd epitopen op eiwitten geassocieerd met negatief geladen fosfolipiden. Momenteel beschikbare laboratorium testen en werkwijzen tonen aanzienlijke verschillen in hun vermogen om te detecteren LAC, 3 , 17 , 18 en geen enkele LAC test voor het opsporen van alle LAC. 3 , 5 , 19 namelijk onderzoeken uitgevoerd overwegend Europa en Australië gedurende de laatste 10 jaar hebben aangetoond variabele sensitiviteit en specificiteit van LAC tests en suboptimale prestaties van laboratoria. 9 , 17 , 20 –22

De huidige studie onderzocht LAC testen patronen en prestaties door gespecialiseerde coagulatie laboratoria in de Verenigde Staten en Canada deelnemen aan NASCOLA / ECAT externe bekwaamheidstesten uitdagingen.Noord-Amerikaanse gespecialiseerd coagulatie laboratoria vertrouwden voornamelijk op APTT-en dRVVT-gebaseerde testen om te screenen op LAC.Screening tests zijn afhankelijk fosfolipiden en hun gevoeligheid voor LAC afhankelijk van de samenstelling van de reagentia, de klasse en concentratie van fosfolipiden en fosfolipide conformatie. Hoewel verschillende methoden gebruikt, Siemens / Dade Behring (Tarrytown, NY) Actin FSL (APTT, LAC-gevoelige reagens) en Stago / Roche (dRVVT) waren het meest populair.

Consistent met eerdere verslagen, 3 , 17 , 18 aanzienlijke variabiliteit in gevoeligheid werd waargenomen tussen methoden. Sterke LAC’s werden meestal geïdentificeerd, maar een aanzienlijke daling off vond plaats in aanwezigheid van intermediaire-en lage-titer LAC’s. Hoewel ringonderzoeken monsters werden gekarakteriseerd als bevattende sterke en zwakke LAC, moet worden opgemerkt dat het onduidelijk is of high-titer LAC sterker risicofactoren voor trombotische complicaties dan lage titer LAC. Bovendien, het laboratorium tests zelf zijn niet kwantitatief, en er zijn geen criteria om zwakke positieve en sterke positieven te definiëren. 23

Er is gesuggereerd dat dRVVT-gebaseerde test is gevoelig en specifiek voor het detecteren LAC, vooral bij patiënten met een hoog risico op trombose. In de afgelopen jaren, heeft de gevoeligheid van APTT-gebaseerde testen verbeterd met modificaties om de analyse fosfolipiden. Echter, is de specificiteit nog steeds gedebatteerd. In de huidige studie, dRVVT-en APTT-gebaseerde screening tests toonden verschillen in gevoeligheid die leek te zijn monster / LAC gerelateerd.Gebaseerd op de resultaten van 1 vaardigheid challenge (2009-2), dRVVT testen bleken specifiek voor LAC is (minder vals-positieve resultaten) vergeleken met APTT-gebaseerde testen. Zoals eerder vermeld, echter, moeten deze gegevens worden met enige voorzichtigheid geïnterpreteerd omdat het aantal datapunten voor individuele methoden in dit onderzoek was relatief klein en het aantal fout-positieve en fout-negatieve resultaten buitengewoon laag. 1 – 3

Mengen studies aanbevolen als onderdeel van LAC testen door ISTH richtlijnen. 1314 mengen studies zijn gebaseerd op de grondgedachte dat een mengsel van gelijke hoeveelheden van de patiënt plasma en plasma pool afgeleid van gezonde mensen aanzienlijk verkort of verbeteren de patiënt verlengde stollingstijd als het gevolg van een tekort van 1 of meer coagulatiefactoren. Daarentegen is het mengsel niet corrigeren verlengde stollingstijd wanneer het door de aanwezigheid van een remmer. Ofschoon eenvoudig in principe, het mengen studie aanzienlijke nadelen, zoals de kwaliteit van normaal plasma gebruikt. Herziene 2009 ISTH richtlijnen staat dat de normale pool 100% van alle stollingsfactoren moet bevatten. Aangezien de bron van normaal plasma gebruikt voor het mengen studies niet werd gevangen op NASCOLA resultaat rapporten, we waren niet in staat om te bepalen of de normale plasma had getest op individuele stollingsfactoren.

Bovendien, problemen bestaan ​​met betrekking tot de interpretatie van het mengen van studies. 5 De herziene 2009 ISTH richtlijnen 14 raden het gebruik van een scheiding voor correctie die buiten het 99e percentiel van de verdeling of de berekening van een ICA. De huidige studie was niet in staat om de lokale criteria die door Noord-Amerikaanse laboratoria om de resultaten van het mengen van studies te interpreteren bepalen. Omdat de ICA wordt algemeen beschouwd als de meest robuuste, 5 berekenden we de ICA om de resultaten van het mengen van studies door analyse en methode te vergelijken. Het is interessant dat de interpretatie van het mengen van studieresultaten door individuele laboratoria met behulp van lokale criteria niet goed correleren met de resultaten van ICA berekeningen, vooral voor monsters 2008-2 en 2008-3. In het algemeen vals-negatieve uitslagen waren lager voor zelf-gerapporteerde mengen studie interpretaties dan voor interpretaties met behulp van de berekende ICA, wat suggereert dat het betrokken land gevestigde afgrenzingsprocedures de prestaties te verbeteren.

Aanzienlijke variatie was opgemerkt in het vermogen van APTT-of dRVVT gebaseerde mengen studies zwakke LAC in monsters te detecteren 2008-2, 2008-3 en 2008-4. Bovendien is er geen enkele assay consequent beter dan alle andere. Inderdaad, het nut van het mengen van studies is aangevochten, 24 vooral omdat zwakke LAC’s kan worden gemist als gevolg van verdunningshyponatriëmie effecten bij het ​​uitvoeren van het mengen van studies, wat leidt tot vals-negatieve resultaten. 3 , 4

Er is gesuggereerd dat het mengen tests toegepast APTT en dRVVT screening en bevestigende tests voor LAC correcte interpretatie te waarborgen. 3 Ondanks ISTH aanbevelingen, een aantal Noordamerikaanse laboratoria niet uitvoeren vermenging studies. Inderdaad, de tekortkoming mengen studies was de reden dat de meeste vaak gezien als de vraag waarom een laboratorium noncompliant met betrekking tot de volgende LAC testen aanbevelingen werd beschouwd.

ISTH richtlijnen verder adviseren het gebruik van bevestigende tests voor de diagnose van LAC. De reden voor het gebruik bevestigende tests is dat het verhogen van de concentratie van fosfolipiden in het testsysteem wordt het effect van LAC neutraliseren en verkort de verlengde stollingstijd als deze door de aanwezigheid van LAC. Noord-Amerikaanse laboratoria gebruikt een combinatie van dRVVT-en APTT-gebaseerde bevestigingsmethoden. Het gebruik van geïntegreerde systemen heeft aan populariteit gewonnen, 5 , 16 vele Noordamerikaanse laboratoria met een APTT-gebaseerde Staclot LA procedure (Stago / Roche), die LAC testen in aanwezigheid van een mengsel van patiënt normaal plasma uitvoert. De intrinsieke heterogeniteit van deze testsystemen wordt bevestigd door de sterk verschillende resultaten die werden waargenomen wanneer de systemen werden vergeleken, hier en in de literatuur. 16

Een groot aantal laboratoria ook uitgevoerd een PNP. In de vier 2008 bekwaamheidstesten uitdagingen met LAC-positieve monsters, PNP methoden bleek het minst gevoelig. Inderdaad, 1 van de 2 PNP methoden die NASCOLA laboratoria (methode 59) niet meer commercieel verkrijgbaar.

Misclassificatie van LAC (fout-positieve en fout-negatieve uitslagen) door Noord-Amerikaanse laboratoria hing af van de sterkte van de LAC, consistent met gerapporteerde voor laboratoria in het Verenigd Koninkrijk en Italië resultaten. 1 ,9 Overwegende dat alle laboratoria correct geïdentificeerd de LAC in steekproef 2008-1 met sterke LAC, een verkeerde diagnose snelheid van ongeveer 25% werd genoteerd voor monsters met zwakke LAC. De combinatie van LAC testen met behulp van de geïntegreerde proef (methode 58) met een dRVVT (methode 81) kan de gevoeligheid voor bepaalde (samples 2008-2 en 2008-3) te verbeteren, maar niet alle (2008-4) zwak LAC’s. Hoewel er is gesuggereerd dat het uitvoeren van meer dan 2 screening tests te veel vals-positieve testresultaten zou opleveren, 25de huidige studie was niet in staat om dit te evalueren omdat de meeste laboratoria uitgevoerd 2 screening tests in overeenstemming met ISTH aanbevelingen, en slechts een enkele LAC- negatief monster was beschikbaar voor analyse.

Het is interessant dat de laboratoria die herhaaldelijk rendered werkende LAC diagnose voor monsters 2008-2, 2008-3, 2008-4 en / of 2009-2, slechts 2 bleek grotendeels veranderen methoden. Omdat laboratorium codes zijn vertrouwelijk, we waren niet in staat om informatie over institutionele afmeting en aansluiting (bijv. prive laboratorium, academisch medisch centrum) van laboratoria die juiste en onjuiste diagnoses gemaakt verkrijgen.

Het totale percentage niet naleven Noordamerikaanse laboratoria in deze studie varieerde van 8% tot 38% in vaardigheid testperiodes. Bovendien laboratoria die noncompliant waren herhaaldelijk trouw gebleven aan hun testpraktijken. Dus, 5 laboratoria waren noncompliant gedurende 3 testen periodes, 2 laboratoria waren noncompliant in 4 bekwaamheidstesten uitdagingen, en 1 laboratorium was incorrect in alle 5 perioden testen.

Laboratorium naleving herzien 2009 LAC testen richtlijnen 14 was moeilijk te beoordelen, omdat het testen werd uitgevoerd vóór hun publicatie. De meeste Noordamerikaanse laboratoria niet testen die niet langer aanbevolen, zoals de verdunde protrombinetijd, ecarine en textarin maal, en kaolien stollingstijd voeren. Hoewel het gebruik van ingevroren en ontdooid bloedplaatjes in het bevestigende test ook wordt niet langer aanbevolen, PNP methoden waren de derde meest gebruikte testplatform (n = 11-17) voor LAC bevestiging.

Deze studie geeft een overzicht van de state-of-the-art van het LAC testen in Noord-Amerikaanse laboratoria die aan NASCOLA bekwaamheidstesten enquêtes.In overeenstemming met de internationale ervaring, detectie van zwakke LAC’s is problematisch, en strikte naleving van ISTH richtlijnen kan worden verbeterd.Zoals eerder gesuggereerd worden speciale LAC testprocedures nodig, maar hun ontwikkeling vereist een beter begrip van het mechanisme (s) geassocieerd met klinische gebeurtenissen.

Hoewel in deze studie niet behandeld, het effect van pre-analytische variabelen, zoals factor remmers of anticoagulantia, voegt complexiteit testen en moeten zorgvuldig worden geëvalueerd voor elke methode-assay combinatie. Bijkomende studies zijn nodig om deze effecten te evalueren en om meer specifieke richtlijnen voor de interpretatie van tests te formuleren onder deze omstandigheden. Alternatief of daarnaast aanbevelingen bij het testen wel en niet worden uitgevoerd zou nuttig voor artsen en laboratoria.

De volgende aanbevelingen worden voorgesteld voor het verbeteren van LAC testen. Sensitiviteit en specificiteit van de test kan worden verbeterd door de oprichting van laboratorium-verwijzingswaaiers en cutoffs voor screening en bevestigende tests, zoals voorgesteld in de 2009 ISTH richtlijnen. 14 Bovendien is de naleving van deze zelfde richtlijnen om combinatie testen uit te voeren met dRVVT-en gevoelige APTT- gebaseerde methoden kan de gevoeligheid voor zwakke LAC’s te verbeteren. Waarnemingen van onze studie tonen een heterogeen patroon voor het detecteren van zwakke LAC’s met verschillende reagentia, waarbij ondersteunen, althans voor de tussentijd het gebruik van een panel van reagentia. Echter, een goed gecontroleerde studie waarbij een aantal monsters van patiënten met zwakke LAC uitgedaagd met verschillende reagentia van verschillende fabrikanten inzicht verschaffen welke reagentia robuuster identificeren zwakke LAC. Bovendien moet de standaardisatie van het mengen studie interpretaties en de rol van het mengen van studies als een screening test voor LAC’s worden beoordeeld in studies waarbij laboratorium en klinische gegevens met elkaar kunnen worden beschouwd. Tenslotte wordt een algemene uitleg van LAC testen, niet alleen de interpretatie van afzonderlijke tests en klinische informatie van een patiënt van een passend diagnose.

Dankwoord

Wij danken Samir Zaman voor hulp bij data-evaluatie.

Voetnoten

  • Ondersteund door fondsen van de Afdeling van Translationeel en Toegepaste Laboratorium Geneeskunde, Afdeling Pathologie, Mount Sinai Medical Center, New York.

Referenties

  1. 1. 
    1. Jennings I ,
    2. Keuken S ,
    3. Woods TAL ,
    4. et al.. ,
    5. voor de Britse National External Quality Assessment Scheme voor Bloedcoagulatiefactor

    Mogelijk klinisch belangrijke onjuistheden in testen voor het lupus anticoagulans: een analyse van de resultaten van drie onderzoeken van de Britse National Quality Assessment Scheme Extern (NEQAS) voor Bloedcoagulatiefactor . Thromb Haemost . 1997 ,77 : 934 – 937 .

  2. 2. 
    1. Giannakipoulos B ,
    2. Passam F ,
    3. Ioannou U ,
    4. et al..

     Hoe wij diagnosticeren de antifosfolipidesyndroom . Bloed . 2009 ; 113 : 985 – 994 .

  3. 3. 
    1. Devreese K ,
    2. Hoylaerts MF

    Laboratorium diagnose van de antifosfolipidesyndroom: een overvloed aan obstakels te overwinnen . Eur J Haematol . 2009 ; 83 : 1 – 16 .

  4. 4. 
    1. Moffat KA ,
    2. Ledford-Kraemer MR ,
    3. Plumhoff EA ,
    4. et al..

     Zijn laboratoria volgende gepubliceerde aanbevelingen voor lupus anticoagulans testen? een internationale evaluatie van de praktijken . Thromb Haemost . 2009 ; 101 : 178 –184 .

  5. 5. 
    1. Tripodi A

    Laboratoriumonderzoek lupus anticoagulantia: een overzicht van onderwerpen die de resultaten beïnvloeden . Clin Chem . 2007 , 53 : 1629 –1635 .

  6. 6. 
    1. Wong RCW ,
    2. voor de Australasian aCL Groep

    richtlijnen consensus voor anticardiolipine antilichaam testen . Thromb Res . 2004 ; 114 : 559 – 571 .

  7. 7. 
    1. Tripodi A ,
    2. Chantarangkul V ,
    3. Clerici M ,
    4. et al..

     Laboratorium diagnose van lupus antistollingsmiddelen bij patiënten die orale antistollingsbehandeling: prestaties van verdunde Russell viper gif testen en silica stollingstijd in vergelijking met Staclot LA . Thromb Haemost . 2002 , 88 : 583 – 586 .

  8. 8. 
    1. Tripoldi A ​​,
    2. Biasiolo A ,
    3. Chantarangkul V ,
    4. et al..

     Lupus anticoagulans (LA) testen: de prestaties van klinische laboratoria beoordeeld door een nationale enquête, waarbij gevriesdroogde affiniteitsgezuiverd immunoglobuline met LA activiteit . Clin Chem . 2003 , 49 : 1608 – 1614 .

  9. 9. 
    1. Pengo V ,
    2. Biasiolo A ,
    3. Gresele P ,
    4. et al.. ,
    5. voor de deelnemende centra van de Italiaanse Federatie van Trombose Centra (FCS)

    Survey van lupus anticoagulans diagnose door de centrale beoordeling van positieve plasma monsters . J Thromb Haemost . 2007 ; 5 : 925 – 930 .

  10. 10. 
    1. Favaloro EJ ,
    2. Wong RCW

    Laboratoriumonderzoek en identificatie van antifosfolipidenantistoffen en de antifosfolipidesyndroom: een potpourri van problemen, een compilatie van mogelijke oplossingen . Semin Thromb Hemost .2008 , 34 : 389 – 410 .

  11. 11. 
    1. Jennings I ,
    2. Greaves M ,
    3. Mackie IJ ,
    4. et al.. ,
    5. voor de Britse National External Quality Assessment Scheme voor Bloedcoagulatiefactor

    Lupus anticoagulans testen: verbeteringen in de prestaties in een Britse NEQAS bekwaamheidstesten uitoefening na verspreiding van nationale richtlijnen over laboratoriumtechnieken . Br J Haematol . 2002 ; 119 : 364 – 369 .

  12. 12. 
    1. Brandt JT ,
    2. Triplett DA ,
    3. Rock WA ,
    4. et al..

     Effect van lupus-anticoagulantia van de geactiveerde partiële tromboplastinetijd . Arch Pathol Lab Med . 1991 ,115 : 109 – 114 .

  13. 13. 
    1. Brandt JT ,
    2. Triplett DA ,
    3. Alving B ,
    4. et al..

     Criteria voor de diagnose van lupus anticoagulantia: een update, namens de subcommissie Lupus anticoagulans / Antiphospholipid van het Wetenschappelijk en Normalisatie Comite van de ISTH .Thromb Haemost . 1995 ; 74 : 1185 – 1190 .

  14. 14. 
    1. Pengo V ,
    2. Tripodi A ,
    3. Reber G ,
    4. et al..

     Actualisering van de richtlijnen voor lupus anticoagulans detectie . J Thromb Haemost . 2009 ; 7 : 1737 – 1740 .

  15. 15. 
    1. Rosner E ,
    2. Pauzner R ,
    3. Lusky A ,
    4. et al..

     Detectie en kwantitatieve evaluatie van lupus circulerende antistollingsmiddelactiviteit . Thromb Haemost . 1987 :57 : 144 – 147 .

  16. 16. 
    1. Triplett DA

    Gebruik van de verdunde Russell viper gif tijd (dRVVT): het belang ervan en valkuilen . J Autoimmun . 2000 , 15 : 173 – 178 .

  17. 17. 
    1. Arnout J ,
    2. Meijer P ,
    3. Vermylen J

    Lupus anticoagulans testen in Europa: een analyse van de resultaten over het eerste Europees gecoördineerde actie op Thrombophilia (ECAT) Survey behulp plasma verrijkt met monoklonale antilichamen tegen menselijke-beta2 glycoproteïne ik . Thromb Haemost . 199981 : 929 – 934 .

  18. 18. 
    1. Wong RCW ,
    2. Favaloro EJ

    consensus benadering tot de formulering van richtlijnen voor laboratoriumonderzoek en rapportage van antifosfolipide antilichaamassays . Semin Thromb Hemost . 2008 , 34 : 361 – 372 .

  19. 19. 
    1. Triplett DA

    antifosfolipidenantistoffen . Arch Pathol Lab Med . 2002 ; 1261424 – 1429 .

  20. 20. 
    1. Roussi J ,
    2. Roisin JP ,
    3. Goguel A

    Lupus anticoagulantia: eerst Frans interlaboratoriumvergelijkingen Etalonorme enquête . Am J Clin Pathol . 1996 ;105 : 788 – 793 .

  21. 21.
    1. Favaloro EJ ,
    2. Bonar R ,
    3. Sioufi J ,
    4. et al..

     Multi-laboratoriumonderzoek van trombofilie: huidige en vroegere praktijk in Australië zoals beoordeeld door het Royal College of Pathologen van de Australazië Quality Assurance Programma’s voor Hematologie . Semin Thromb Hemost . 2005 ; 31 : 49 – 58 .

  22. 22. 
    1. Favaloro EJ ,
    2. Bonar R ,
    3. Duncan E ,
    4. et al.. ,
    5. namens de RCPA QAP in Hematologie Hemostase Comite

    Identificatie van factor remmer door diagnostische hemostase laboratoria: een grote multicenter evaluatie . Thromb Haemost . 2006 ; 96 : 73 – 78 .

  23. 23. 
    1. Teruya J ,
    2. West AG ,
    3. Suell MN

    Lupus anticoagulans assays: vragen beantwoord en worden beantwoord . Arch Pathol Lab Med . 2007 ; 131 : 885 –889 .

  24. 24. 
    1. Ledford-Kraemer MR

    Laboratoriumonderzoek lupus anticoagulantia: preexamination variabelen, mengen studies, en de diagnostische criteria . Semin Thromb Hemost . 2008 , 34 : 380 – 388 .

  25. 25. 
    1. Tripodi A

    Laboratoriumonderzoek lupus anticoagulantia: diagnostische criteria en het gebruik van screening, mengen, en bevestigende studies . Semin Thromb Hemost . 2008 , 34 : 373 – 378 .

Artikelen citeren dit artikel

  • GA Fritsma ,
  • FR Dembitzer ,
  • A. Randhawa ,
  • MB Marques ,
  • EM Van Cott,
  • D. Adcock-Funk ,
  • en EI Peerschke

Aanbevelingen voor passende Geactiveerde partiële tromboplastine tijd reagensselectie en IngebruiknameAm J Clin Pathol 2012 137 : 904 – 908

2,494 totaal aantal vertoningen, 2 aantal vertoningen vandaag

*